Transcreener 检测依赖于核苷酸的直接免疫检测,与复杂的酶偶联检测方案相比,这种检测方法不易受到干扰。
四种类型的 Transcreener 核苷酸检测分析使您能够更快、更有效地筛选数千种目标酶。
您选择的 FP、FI 和 TR-FRET 读数;所有这些都具有远红荧光和主要多模阅读器的认证性能。
均质、混合和读取格式可用于终点分析或酶活性的连续监测。
过夜试剂和信号稳定性意味着大型自动化筛选中可靠、稳健的筛选数据。
Transcreener 是一种通用检测方法,可用于整个核苷酸依赖性酶家族。与其对大量特定反应产物(例如磷酸化蛋白质或脂质)使用单独的测定法,不如对产生共同核苷酸产物的所有酶使用单核苷酸检测测定法。例如,ADP 检测可用作任何蛋白质、脂质或碳水化合物激酶的通用激酶测定方法。
Transcreener 检测依赖于使用能够根据单个磷酸基团区分核苷酸的抗体对核苷酸的直接、高度特异性检测。产物核苷酸与底物(例如,ADP 与 ATP 用于激酶测定)的选择性范围从 150 倍到 1000 倍以上。这种精确的选择性允许在存在过量底物核苷酸的情况下检测核苷酸酶产物(例如,在存在过量 ATP 的情况下检测 ADP 用于激酶测定),这是测量酶初始速度的必要条件。
为了产生信号,Transcreener Assays 使用同质、竞争性免疫分析形式,其中抗体与高亲和力荧光示踪剂配对。被检测的核苷酸取代示踪剂会导致其荧光特性发生变化。FP 检测是简单的;它只需要示踪剂和未修饰的抗体;极化的变化是由示踪剂在移动时增加的旋转迁移率引起的。对于 TR-FRET 和 FI 格式,抗体与一种分子偶联,该分子在结合时会改变示踪荧光的强度,而当示踪剂被置换时,这种效果就会消失。
与任何其他核苷酸检测分析相比,Transcreener 分析具有更少的试剂和更简单的机制,这通常需要偶联酶将核苷酸转化为可以与报告酶产生信号的产物。每个偶联酶和报告酶都是被筛选化合物的潜在靶标,这会增加假阳性或错过命中的风险,并且需要额外的孔进行反筛选。(一些 ADP 检测分析甚至使用激酶作为偶联酶,进一步使它们用于激酶抑制剂筛选复杂化。)
直接检测还意味着该协议是简单、最灵活的可用方案:运行酶反应,添加具有终止混合物的 Transcreener 试剂,并读取板。或者可以在酶反应开始时加入Transcreener检测试剂,持续监测酶活性;例如,用于使用“跳跃稀释"激酶测定测量抑制剂停留时间。一些耦合方法需要额外的液体添加和孵育步骤,这使化验自动化变得复杂并妨碍它们以连续模式运行。
货号 | 产品描述 | 价钱 |
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2233 | 康宁 96 孔黑色检测板 (#3686),3 件装(200 多种检测) | 40.00 美元 |
2229 | 康宁 384 孔黑色检测板 (#4514),3 件装(1,000+ 检测) | 45.00 美元 |
2230 | 康宁 384 孔黑色测定板 (#4514),30 件装(10,000+ 测定) | 400.00 美元 |