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CompTech EA 说明书

 发布时间:2018/7/4 点击量:479

 

AMJS澳金沙门为complementtech一级经销商,Complement Technology,Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收购Advanced Research TechnologiesComplement Technology继续为世界各地的科学家提供高质量的试剂,并在我们的清单中增加了许多新试剂。我们尽力为您的应用提供试剂和使用我们补充试剂的建议。 

CompTech EA 说明书

名称:   EA(抗体致敏绵羊红细胞) 

     EA (antibody-sensitized sheep erythrocytes)                 

目录号:   B200 和B201 和B202           

可用尺寸: 5 mL , 10 mL和20 mL                

浓度:          5×10 8个细胞/ mL

吸光度:              412nm处 = 0.87以1/50稀释在去离子水中

形式:                         液体 - 不要冻结

活性:                     补体CH50检测功能齐全

缓冲区:                       GVB ++ (CompTech#B100和B102)

防腐剂:             GVB ++含有0.025%sodium azide作为杀菌剂

储存:                     + 4 o C 避免冷冻。冷冻裂解细胞。    

资源:                       正常 来自美国农业部注册设施的羊血。

产地:                       制造于美国。

 

一般描述

            涂有兔抗羊红细胞抗血清(溶血素)的绵羊红细胞传统上用于测定血清样品中补体经典途径的活性。  这些测定产生血清的CH50滴度(Morgan,BP(2000); Dodds,AW和Sim,RB(1997))。 

            在CH50测定(GVB ++)中使用的传统缓冲液中以测定准备浓度提供EA 。  他们每周一早上准备新鲜,需要在 周五之前订购,以便在下周接收。  它们在周一下午由隔夜快递运送到周二(或大多数货运的周三)。它们通常可在制备后使用2周。他们被运往冷,但并不在室温下长时间伤害(请注意,循环60-90天,37 Ø ç 体内)。它们应该一次每次使用前(在500 3分钟,4〜1000×g下进行洗涤ö C)和再悬浮       在GVB ++中的原始浓度 以减少背景。  该程序也可用于浓缩细胞。  这可以通过减少用于重悬细胞的体积来实现。

 

物理特征

            由于以下原因,EA由IgM抗体制成。  IgM在激活经典途径方面比IgG高约100倍,因为C1q必须与抗体上的至少两个Fc结构域结合以进行激活。  因此,在敏感的测定中,已经估计每个EA少至10个IgM可以引起裂解,而IgG裂解每个EA需要大约1000个IgG(Ross,GD(1986))。  这主要是因为在IgM中,在每个分子上的固定位置上存在五个紧密间隔的Fc结构域。  因为表面上IgG分子的间隔更随机,所以在细胞表面上的正确位置发现2至5个IgG分子以结合并激活C1的可能性较小。

 

测定

            尽管CH50滴度被广泛使用并且作为补体活性的主要临床试验,但CH50测定程序尚未*标准化。  在研究实验室中,有与实验室一样多的程序,但所有程序基本相似并且给出有用的结果。  可根据要求从CompTech获得详细的逐步典型CH50滴定方法。  简而言之,稀释含有补体的血清样品,使得测定中的终稀释度为1/100至1/500。  对照包括两个没有0%裂解背景补体的试管和两个试管,其中用水代替缓冲液进行100%裂解对照。  在湿冰上应设置分析管。  用GVB +使体积达到1.3mL或水),将管混合并加入0.2mL 5×10 8EA / mL的细胞并混合。  的反应,应温育在37 60分钟 ö ℃水浴含有大约10周分钟的间隔再混合。  1小时后,将剩余的细胞离心(500-1000×g,3分钟),并在1cm比色皿中在541nm处测定上清液的吸光度。  有多种数学方法可用于绘制结果图。通过在对数 - 对数图上绘制x轴上的每个测定中使用的微升血清和y轴上的y /( 1-y),可以获得几乎的直线。  术语“y”是指裂解的细胞的比例,在0%裂解时为0,在30%裂解时为0.3,在50%裂解时为0.5,等等。  补体样品的CH50值从该线在y轴上穿过1.0(50%裂解)获得,并计算如下:CH50 = 1000除以血清的体积(以μL计),得到50%裂解。  例如,如果用5.6μL血清达到50%裂解,则CH 50 = 179单位/ mL。  应该注意的是,可以在应该是相同的样品上获得不同的CH 50值。  这是  CH50测定中涉及的大量变量的结果,包括在春季收获的绵羊红细胞比在秋季抽取的血液中的细胞更容易溶解,没有两个溶血素抗体很多是相同的,因为它们是由兔子等产生的抗血清制成的。

           

应用

            EA可用于确定血清的CH50溶血滴度,即CH50(参见上文的测定)。  它们可用于使用耗尽的血清滴定单个补体成分的功能活性。  它们也可用于制备携带活化的补体中间体的细胞(Morgan,BP(2000); Dodds,AW和Sim,RB(1997))。  将EA与C1温育以制备(EAC1)或C1和C4(EAC14)。  可以将EAC14细胞与C2一起温育以制备携带经典途径C3转化酶的EAC142细胞,并且可以将EAC142与C3一起温育以制备携带C5转化酶的EAC1423细胞。  每种中间体可用于测定流体相组分的功能补体活性。  例如,EAC142细胞的裂解对低C3浓度极其敏感,并且即使在诸如血清的复杂混合物中,这也可用于滴定C3补体活性。

 

规    

            绵羊红细胞(Es)用于人补体测定,部分是为了方便,但也因为它们缺乏人补体的膜结合调节剂。  对于人补体,在Es上不存在显着水平的功能性DAF,CD59或CR1。  因此,Es对于它们缺乏膜调节活性是有用的。

 

参考

摩根,BP编辑。(2000)补充方法和协议。  Humana新闻。

 

Dodds,AW和Sim,RB编辑(1997年)。补充实用方法(ISBN 019963539)牛津 大学 按, 牛津。

 

Ross,GD(1986)补体系统的免疫生物学。(ISBN 0-12-5976402)奥兰多学术出版社。

 

 

仅供研究使用。

不适合人类或药物使用。

 

 

complementtech产品目录:

 

货号

品名

规格 

目录价

品牌

A098

C1

200µg

3400

complementtech

A099

C1q

1000µg

3162

complementtech

A100

C1q (40% Glycerol)

1000µg

3162

complementtech

A102

C1r Enzyme

250µg

3417

complementtech

A103

C1s Proenzyme

250µg

3366

complementtech

A104

C1s Enzyme

250µg

3281

complementtech

A140

C1 Esterase Inhibitor

1000µg

3468

complementtech

A112

C2

50µg

3298

complementtech

A113

C3

250µg

2482

complementtech

A113c

C3 (concentrated)

1000µg

7327

complementtech

A118

C3a

50µg

3162

complementtech

A119

C3a desArg

50µg

3043

complementtech

A114

C3b

250µg

3094

complementtech

A115

iC3b

250µg

3417

complementtech

A116

C3c

250µg

3706

complementtech

A117

C3d

100µg

3825

complementtech

A105

C4

250µg

3468

complementtech

A105c

C4 (concentrated)

1000µg

8245

complementtech

A106

C4a

50µg

4114

complementtech

A107

C4a desArg

50µg

4114

complementtech

A108

C4b

250µg

2992

complementtech

A109

C4b Binding Protein

250µg

4131

complementtech

A120

C5

250µg

3570

complementtech

A144

C

30µg

6188

complementtech

A144(300)

C

300µg

询价

complementtech

A145

C desArg

50µg

4301

complementtech

A122

C5b,6

50µg

3468

complementtech

A123

C6

250µg

3366

complementtech

A124

C7

250µg

3366

complementtech

A125

C8

250µg

3536

complementtech

A126

C9

250µg

3366

complementtech

A127

SC5b-9 Complex

100µg

2992

complementtech

A135

Factor B

250µg

3213

complementtech

A136

Factor D

25µg

3417

complementtech

A137

Factor H

250µg

2958

complementtech

A137c

Factor H (conc.)

10000µg

询价

complementtech

A138

Factor I

100µg

3366

complementtech

A139

Factor P

100µg

3468

complementtech

A150

Cobra Venom Factor  (USA ONLY)

1000µg

3298

complementtech

A154

Factor Ba

100µg

3298

complementtech

A155

Factor Bb

250µg

6188

complementtech

A118

C3a

50µg

3162

complementtech

A119

C3a desArg

50µg

3043

complementtech

A106

C4a

50µg

4114

complementtech

A107

C4a desArg

50µg

4114

complementtech

A144

C

30µg

6188

complementtech

A144(300)

C

300µg

询价

complementtech

A145

C desArg

50µg

4301

complementtech

A300

C1q-Dpl

1ml

2074

complementtech

A312

C2-Dpl

1ml

2074

complementtech

A314

C3-Dpl

1ml

2482

complementtech

A305

C4-Deficient Guinea Pig

1ml

2448

complementtech

A308

C4-Dpl           

1ml

2482

complementtech

A320

C5-Dpl

1ml

2125

complementtech

A323

C6-Dpl

1ml

2040

complementtech

A324

C7-Dpl

1ml

2074

complementtech

A325

C8-Dpl

1ml

2074

complementtech

A326

C9-Dpl

1ml

2074

complementtech

A335

Factor B-Dpl

1ml

2074

complementtech

A336

Factor D-Dpl   

1ml

2074

complementtech

A337

Factor H-Dpl

1ml

2686

complementtech

A338

Factor I-Dpl    

1ml

2482

complementtech

A339

Factor P-Dpl

1ml

2482

complementtech

A340

C3/C4 Inactivated Serum

1ml

2074

complementtech

A399

C1q/Factor D-Dpl  

1ml

2856

complementtech

A200

Goat Anti-Human C1q     

1ml

1054

complementtech

A212

Goat Anti-Human C2

1ml

2329

complementtech

A213

Goat Anti-Human C3

1ml

1054

complementtech

A218

Rabbit Anti-Human C3a

1ml

2550

complementtech

A205

Goat Anti-Human C4

1ml

1054

complementtech

A206

Rabbit Anti-Human C4a

1ml

2550

complementtech

A220

Goat Anti-Human C5

1ml

1275

complementtech

A221

Rabbit Anti-Human rC

1ml

2550

complementtech

A223

Goat Anti-Human C6

1ml

1275

complementtech

A224

Goat Anti-Human C7

1ml

1275

complementtech

A225

Goat Anti-Human C8

1ml

1275

complementtech

A226

Goat Anti-Human C9

1ml

1275

complementtech

A227

Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)

0.2ml

2584

complementtech

A235

Goat Anti-Human Factor B

1ml

1275

complementtech

A236

Goat Anti-Human Factor D

1ml

2499

complementtech

A237

Goat Anti-Human Factor H

1ml

1275

complementtech

A238

Goat Anti-Human Factor I

1ml

1309

complementtech

A239

Goat Anti-Human Factor P

1ml

1462

complementtech

A240

Goat Anti-Human C1-INH        

1ml

1173

complementtech

A260

Rabbit Anti-Human Vitronectin

1ml

1445

complementtech

NHS

Human Serum

1ml

578

complementtech

GPS

Guinea Pig Serum

1ml

714

complementtech

NRS

Rat Serum

1ml

901

complementtech

NMS

Mouse Serum   

1ml

1309

complementtech

B102

GVB++ (with Ca and Mg)

250ml

1224

complementtech

B100

GVB++ (with Ca and Mg)

1 Liter

3264

complementtech

B103

GVB° (without Ca and Mg)

250ml

1224

complementtech

B101

GVB° (without Ca and Mg)

1 Liter

3264

complementtech

B104

GVBE (with EDTA)

250ml

1224

complementtech

B105

GVBE (with EDTA)

1 Liter

3264

complementtech

B110

SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

250ml

1870

complementtech

B111

SGVB++(low ionic strength w/Sucrose)

1 Liter

5066

complementtech

B112

VBS++ (with Ca and Mg)

250ml

1224

complementtech

B113

VBS++ (with Ca and Mg)

1 Liter

3264

complementtech

B200

EA (Ab-sensitized sheep E)

5ml @ 5x108/ml

3043

complementtech

B201

EA (Ab-sensitized sheep E)

10ml @ 5x108/ml

4556

complementtech

B202

EA (Ab-sensitized sheep E)

20ml @ 5x108/ml

6324

complementtech

B210

Es (sheep E)

20ml @ 5x108/ml

2652

complementtech

B300

Er (rabbit E)

5ml @ 5x108/ml

1649

complementtech

B301

Er (rabbit E)

10ml @ 5x108/ml

2652

complementtech

B302

Er (rabbit E)

20ml @ 5x108/ml

3893

complementtech

B400

Zymosan (preactivated)

10ml @ 1x109/ml

2261

complementtech

B106

MgEGTA

10ml @ 0.1M

1139

complementtech

B250

MCAR

1.0 ml

2482

complementtech

Hemolysin

Hemolysin  NEW

2.0 ml

2040

complementtech

 

 

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