Molecular Cloning Laboratories（MCLAB）成立于1998年，是为生命科学界提供基因组研究耗材和服务的先进者。
MCLAB提供具有成本效益的消耗品和试剂，专注于代以及新一代测序和DNA片段分析。我们提供大量分子生物学相关产品，包括抗体，生化试剂，克隆试剂盒，酶，PCR试剂盒，蛋白质凝胶和溶液等。作为我们自己的制造商，我们可以控制生产流程，并大限度地减少定制和大规模订单的延迟。它有助于确保我们的客户获得高质量和价值。
MCLAB拥有一支由20 多位经验丰富的科学家组成的团队，致力于为研究人员提供的服务。我们专注于基因组学领域，拥有DNA测序，发酵，片段分析，分子克隆，过表达，蛋白质纯化和蛋白质合成方面的专家。我们采用量身定制的客户服务方式，让您有机会定制您的项目，并直接与我们的科学家团队交流以获得技术支持。凭借二十多年的经验，我们才华横溢，技术的员工致力于为您提供所需的成果。
I-5™Hi-Fi HotStart DNA聚合酶
I-5 Hi-Fi DNA HotStart聚合酶是一种高保真，快速的DNA聚合酶。
名称 | 货号 | 描述 |
I-5™Hotstart DNA聚合酶 | I5HD-100 | 250单位，2.5 U /μl |
I-5™Hotstart DNA聚合酶 | I5HD-200 | 1,250单位，2.5 U /μl |
I-5™Hotstart DNA聚合酶 | I5HD-OEM | 任何尺寸 |
概述
I-5 Hi-Fi DNA HotStart聚合酶是一种超快速和高保真的DNA聚合酶。它提供了对困难模板的强大扩增，包括质粒，BACS，基因组DNA和λDNA。它允许扩增高达8kb的人类基因组DNA和高达21kb的λDNA。它的扩展速度为1 kb / 10-15秒，具体取决于模板类型。这允许用户通过加速PCR反应来节省时间并提供比Taq或Pfu更高的保真度。该酶含有HotStart机制，可在酶加热前使酶失活。这允许用户在室温下设置PCR反应而不必担心引物二聚体或非特异性预扩增。
特点
•快速 - 比热启动快4倍Taq
•稳健 - 高抑制剂耐受性
•高产量 - 率
•长PCR产物
源
大肠杆菌
应用
热启动PCR
常规PCR
快速PCR
高通量PCR
基因分型
提供
5X反应缓冲液（1ml，含5X MgCl 2 ）
50mM MgCl 2（1ml）（用于优化）
提供（缓冲液描述）
20mM Tris-HCl，100mM KCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，200ug / ml BSA，50％甘油，1X稳定剂，pH 8.0 @ 25℃
储存条件
-20ºC
单位定义
一个单位是在72℃下在15分钟内将5nmol dNTP掺入酸不溶性物质中的酶量。
参考
Frey，B。和Suppman，B。（1995）。Biochemica公司。2,34-35。
Chester，N。和Marshak，DR（1993）。分析生物化学。209,284-290。
运输条件
干冰
用户协议
| 25μl反应 | 50μl反应 | 终集中 |
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说明 |
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| 25μl反应 | 50μl反应 | 终集中 |
I-5 5X缓冲液 | 5 ul | 10 ul | 1X（见注释） |
10μM引物A. | 1μl | 2μl | 400μM |
10μM引物B. | 1μl | 2μl | 400μM |
模板DNA | 如所须 | 如所须 | 看笔记 |
50mM MgCl 2 | 如所须 | 如所须 | 看笔记 |
I-5酶 | 0.5 - 1 ul | 1 - 2 ul |
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水（ddH 2 O） | 高达25μl | 高达50μl |
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热循环条件 |
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3步PCR |
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步 | 温度 | 时间 |
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初始变性 | 98℃ | 2分钟 |
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变性 | 98℃ | 10秒 | 25-35个周期 |
退火 | 55°C - 68°C | 10-15秒 |
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延期 | 72℃ | 10-15秒/ kb |
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终延期 | 72℃ | 1-5分钟 |
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| 4℃下 | 保持 |
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2步PCR（见注释） |
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步 | 温度 | 时间 |
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初始变性 | 98℃ | 2分钟 |
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变性 | 98℃ | 10-15秒 | 25-35个周期 |
联合退火和扩展 | 72℃ | 15-30秒/ kb |
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终延期 | 72℃ | 1-5分钟 |
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| 4℃下 | 保持 |
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笔记 |
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推荐的DNA模板添加 |
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基因组DNA | 50-250 ng |
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质粒DNA | 1PG-在10ng |
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病毒DNA | 1PG-在10ng |
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Mg 2+ |
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1X I-5 PCR Master Mix 中Mg 2+的终浓度为1.5mM |
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根据需要以0.5 mM的增量 添加额外的Mg 2+ |
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建议的终Mg 2+浓度范围为2 mM至4 mM |
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2步PCR |
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当引物T m值> 68°C 时，建议使用2步PCR |
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PCR产物/克隆 |
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2X I-5 PCR Master Mix产生具有平末端的PCR产物 |
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使用本产品进行PCR后，建议使用平端克隆 |
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对于T / A克隆，PCR产物应在A加入前纯化 |
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部分产品：
名称 | 货号 | 尺寸 | 浓度 |
大肠杆菌DNA连接酶 | EDLA-100 | 1,000个单位 | 10,000 U / ml |
大肠杆菌DNA连接酶 | EDLA-200 | 5,000个单位 | 10,000 U / ml |
大肠杆菌DNA连接酶 | EDLA-OEM | 任何尺寸 |
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APE 1 | APE-100 | 3,750 units | 15,000 U/ml |
APE 1 | APE-200 | 15,000 units | 15,000 U/ml |
APE 1 | APE-OEM | Any Size |
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名称 | 货号 | 描述 | |||
I-5™2X高保真混色 | I5HM-100 | 100次反应（50μl体积） | |||
I-5™2X高保真混色 | I5HM-200 | 500次反应（50μl体积） | |||
I-5™2X高保真混色 | I5HM-5000 | 5,000次反应（50μl体积） | |||
I-5™2X高保真混色 | I5HM-25K | 25,000次反应（50μl体积） | |||
I-5™2X高保真混色 | I5HM-OEM | OEM | |||
名称 | 货号 | 描述 | |||
2x BlueStar™PCR Master Mix | BSPM-100 | 100次反应（50μl体积） | |||
2x BlueStar™PCR Master Mix | BSPM-200 | 1,000次反应（50μl体积） | |||
名称 | 货号 | 尺寸 |
HoTaq DNA聚合酶（热启动） | HT-200 | 500个单位，5 U /μl |
HoTaq DNA聚合酶（热启动） | HT-205 | 2,500个单位，5 U /μl |
HoTaq DNA聚合酶（热启动） | HT-210 | 5,000单位，5 U /μl |
HoTaq DNA聚合酶（热启动） | HT-OEM | 任何尺寸 |
名称 | 货号 | 描述 |
10 x PBS（磷酸盐缓冲盐水） | PBS10-100 | 500毫升 |
10 x PBS（磷酸盐缓冲盐水） | PBS10-200 | 1升 |
10 x PBS（磷酸盐缓冲盐水） | PBS10-OEM | OEM |
名称 | 货号 | 描述 |
I-5™Hi-Fi DNA聚合酶 | PDP-100 | 250单位，2.5 U /μl |
I-5™Hi-Fi DNA聚合酶 | PDP-200 | 1,250单位，2.5 U /μl |
I-5™Hi-Fi DNA聚合酶 | PDP-OEM | 任何尺寸 |
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