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Haematologic HCXI-0150说明书

 发布时间:2018/10/15 点击量:519

Haematologic HCXI-0150说明书

HTI HCXI-0150

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCXI-0150说明书

Human Coagulation Factor XI

人凝血因子XI

HCXI-0150 Human Factor XI

 

 

因子XI
的结构域结构表示因子XI单体的结构域结构。鉴定为R1至R4的区域对应于四个串联氨基酸序列重复,其终包含因子XIa的重链。在因子XIIa的蛋白水解活化期间,包含因子XIa的轻链的“催化结构域”从重链区域切割下来。因子XIa的重链和轻链通过二硫键保持相关。成熟因子XI分子是由两个明显相同的单体组成的同型二聚体,其通过二硫键保持缔合。

 

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HCXI-0150 人因XI 

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尺寸

50微克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存储

-20℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

凝血试验

保质期(妥善保存)

12个月

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因子XI是血浆糖蛋白,其在与高分子量激肽原的非共价复合物中循环(1)。成熟分子在肝脏中合成,是双链同源二聚体,分子量约为160,000(2,3)。据估计,总质量的5%可归因于碳水化合物(2)。两种相同的单体具有80,000的分子量,并通过二硫键连接在一起。因此,通过SDS-PAGE分析,因子XI表现为单一条带,非还原(Mr = 160,000)和还原(Mr = 80,000)。

因子XI作为酶原循环并且需要蛋白水解活化以获得丝氨酸蛋白酶活性。因子XI向因子XIa的转化由因子XIIa催化,并导致每个单体(3)中Arg369-Ile370键的裂解。因子XIa由两个NH2-末端衍生的重链和两个COOH-末端衍生的轻链组成,所有这些轻链通过二硫键保持在一起。因子XIa通过催化因子IX向因子IXa的转化而参与凝血的内在途径。一种称为血浆促凝血酶原激酶前因缺陷的出血性疾病是由缺乏因子XI促凝血活性引起的(4,5)。在因子XI缺陷患者中观察到的可变的出血倾向与因子XI活性或抗原水平无关。

从历*看,因子XI由于其相对较低的血浆浓度及其对蛋白水解的敏感性而难以纯化(6)。因子XI从新鲜冷冻血浆中纯化,其通过添加的抑制剂稳定。首先用BaCl 2处理血浆以除去维生素K依赖性蛋白质,然后通过亲和层析分离因子XI。在肝素琼脂糖凝胶上的终色谱步骤产生完整因子XI的均匀制备。成品以50%(vol / vol)甘油/ H2O供应,应储存在-20oC。

凝胶

Novex 4-12%Bis-Tris

加载

人因子XI,每泳道1μg

缓冲

MOPS

标准

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脱氢酶(51 kDa),酒精脱氢酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

特别说明

由于存在高达50%的β形式,重链是双重链。α-Xa向β-Xa的转化通过α-Xa对α-Xa的自动切割发生,导致COOH末端肽的丧失。

 

 

本土化

等离子体; 与高分子量激肽原相关

血浆浓度

2-7μg/ ml(2,3,7,8)

行动方式

酶原; 丝氨酸蛋白酶因子XIa的前体

分子量

160,000(人类)(2,3)

消光系数

Ë

1%

1厘米,280纳米

 

= 13.4(人类)(2)

 

等电点

8.9-9.1

结构体

同二聚体由两个明显相同的亚基(Mr~80,000)组成,由二硫键连接在一起。单体含有四个串联氨基酸重复序列,与血浆前激肽释放酶具有同源性(9)。

碳水化合物百分比

5%(人)(2)

  1. Thompson,RE,et al。,J.Clin。Invest。,60,1376(1977)。
  2. Kurachi,K。和Davie,EW,Biochemistry,16,5831(1977)。
  3. Bouma,BN和Griffen,JH,J.Biol。Chem。,252,6432(1977)。
  4. Rosenthal,RL,et al。,Proc。SOC。进出口。生物学。Med。,82,171(1953)。
  5. Forbes,CD和Ratnoff,J.,J。Lab。临床。Med。,79,113(1972)。
  6. Kurachi,K。和Davie,EV,Methods Enzymol。,80,211(1981)。
  7. Wuepper,KD,美联储。Proc。,31,624(1972)。
  8. Saito,H。和Goldsmith,G.,Blood,50,377(1977)。
  9. Fujikawa,K。等,Biochemistry,25,2417(1986)。

 

 

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