ALSTEM VP100说明书
ALSTEM是一家位于湾区的早期生物技术公司，拥有快速扩展的产品和服务组合，为生物制药和学术机构提供服务。受到加利福尼亚干细胞研究承诺的启发，ALSTEM于2012年由具有iPS细胞重编程和基因组编辑技术专业知识的科学家创立。
描述
慢病毒包装混合物是一种即用型第三代基于HIV的慢病毒包装系统，其中质粒表达慢病毒生产所需的元件。为了生产高质量的慢病毒颗粒，所需要的只是含有您感兴趣基因的慢病毒表达载体。慢病毒包装混合物含有必需的包装载体，其含有病毒结构蛋白和包膜载体以表达水泡性口炎病毒糖蛋白（VSVG）。慢病毒包装混合物是TAT独立的，因为它仅支持具有嵌合5'LTR的慢病毒表达载体，其中HIV启动子被CMV或RSV替代。
产品规格 | |
产品名称 | 慢病毒包装混合物 |
目录 ＃ | VP100 |
尺寸 | 200μl |
运输 | 环境温度 |
储存和稳定性 | 储存在-20°C。根据指示储存，本产品可稳定保存6个月。应通过分成一次性等分试样来小化冻融循环。将等分试样储存在-20°C冰箱中直至准备使用。 |
质量控制 | 每批慢病毒包装混合物在使用人胚胎肾293细胞的转染测定中进行功能测试。 |
用法 | 对于100毫米慢病毒包装，将2.5微克慢病毒表达载体与20微克慢病毒包装混合物混合。 对于150毫米慢病毒包装，将5微克慢病毒表达载体与40微克慢病毒包装混合物混合。 |
限制使用 | 仅供研究使用。不得用于诊断或治疗程序。 |
慢病毒包装混合物是第三代包装质粒的优化配方，提供辅助功能以及产生高滴度慢病毒所需的反式结构和复制蛋白。
1.将含有慢病毒颗粒的培养基从平板转移到无菌容器中，并以300×g离心培养基10分钟以除去细胞碎片。
2.通过0.45μm过滤器过滤上清液。
3.将过滤的上清液转移到无菌容器中，并向每4体积的含有慢病毒的上清液中加入1体积的冷的慢病毒沉淀溶液（4℃）。（实施例：5ml慢病毒沉淀溶液，含20ml病毒上清液）。
4.充分混合并冷藏3小时至过夜。与Lentivirus沉淀溶液混合的含有慢病毒的上清液在4°C下可稳定长达4天。
5.在4℃下以1500×g离心混合物30分钟。离心后，慢病毒颗粒可在容器底部显示为米色或白色颗粒。
6.丢弃上清液。通过以1500×g离心5分钟来旋转残留溶液。通过抽吸去除所有的液体痕迹，小心不要打扰颗粒中沉淀的慢病毒颗粒。
7.使用冷的无菌PBS或DMEM在4℃下以1/10至1/100的原始体积重悬慢病毒颗粒。
8.在低温小瓶中分装并储存在-80°C直至准备使用。
| 货号 | 品名 | 规格 | 品牌 |
| VB100 | ViralBoost | 1毫升 | alstembio |
| VC100 | 慢病毒沉淀解决方案 | 100毫升/ 250毫升/ 500毫升 | alstembio |
| V020 | TransPlus™病毒转导增强剂 | 100μl/500μl | alstembio |
| CILV02 | hTERT细胞永生化试剂盒 | 5 x20μl | alstembio |
| VC200 | 逆转录病毒沉淀解决方案 | 100毫升/ 250毫升/ 500毫升 | alstembio |
| VP100 | 慢病毒包装混合物 | 200μl | alstembio |
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