一、基础信息
1. 核心标识
- 货号:LUCK-1G、LUCK-100、LUCK-250、LUCK-300、LUCK-500、LUCK-2G、LUCK-3G、LUCK-4G、LUCK-5G、LUCK-10G
- 中文名:D-荧光素钾盐
- 英文名:D-Luciferin, Potassium Salt
- 品牌:GoldBio
- 规格:1克/瓶(冻干粉形式)
- CAS号:115144-35-9
- 化学结构:属于杂环化合物,分子中包含噻唑和苯并噻唑基团,钾盐形式确保其在水溶液中的高溶解性。
2. 纯度与稳定性
- 纯度:≥99%(HPLC验证),杂质含量极低(锌/铜离子<0.0001%),避免非特异性发光干扰。
- 储存条件:-20℃避光密封保存,24个月内活性保持≥90%;短期可在4℃存放3个月。产品在常温下运输稳定,无需特殊冷链。
- 溶解性:易溶于水(≥50 mg/mL)、DMSO(≥10 mg/mL),微溶于乙醇。预优化的150 mg/mL PBS溶解方案可在10秒内溶解,无需过滤除菌。
二、作用原理
D-荧光素钾盐(GOLDBIO)的发光机制基于萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)催化的生物化学反应:
1. 底物激活:在ATP和镁离子(Mg²⁺)存在下,荧光素酶与D-荧光素钾盐结合形成酶-底物复合物。
2. 氧化脱羧:复合物在氧气参与下发生氧化脱羧反应,生成氧化荧光素(Oxyluciferin)并释放二氧化碳。
3. 能量转化:反应释放的化学能转化为光能,发射波长为560 nm的黄绿色荧光。当底物过量时,光量子数与荧光素酶浓度呈严格线性关系,从而实现定量检测。
4. 体内成像特性:在37℃生理条件下,荧光波长会红移至600-620 nm,更适合穿透生物组织,因此可通过生物发光成像(BLI)技术对活体动物进行无创监测。
三、解决的实验问题
(一)活体成像领域的核心挑战
1. 肿瘤转移监测:传统组织切片法无法动态追踪肿瘤细胞迁移,而LUCK-1G配合荧光素酶标记的肿瘤细胞,可通过BLI实时观察肿瘤生长、转移及药物干预效果。例如,低至10个标记细胞的微转移灶即可被检测到,灵敏度较传统方法提升10倍。
2. 干细胞治疗评估:在干细胞移植研究中,通过监测荧光素酶信号可量化干细胞在体内的存活、分化及归巢效率,为细胞治疗的疗效评估提供直接证据。
3. 传染病模型研究:针对细菌或病毒感染模型,LUCK-1G可用于追踪病原体在宿主体内的分布及增殖动态,助力抗感染药物的研发。
(二)体外检测的关键需求
1. 基因表达定量:作为报告基因(如pGL3质粒)的底物,LUCK-1G可快速检测启动子活性、转录因子功能及基因编辑效率。其发光信号强度与荧光素酶表达量直接相关,检测下限低至0.02 pg,显著优于传统的β-半乳糖苷酶或GFP报告系统。
2. ATP水平测定:ATP是细胞能量代谢的核心指标,LUCK-1G通过发光强度间接反映ATP浓度,可用于细胞活力评估(替代MTT/CCK-8法)、微生物污染检测及药物毒性筛选。
3. 高通量筛选优化:在药物研发中,LUCK-1G支持96孔板或384孔板的自动化检测,适用于靶向荧光素酶或ATP代谢通路的化合物库筛选,节省实验时间和成本。
(三)实验操作的痛点突破
1. 低背景干扰:GoldBio的低温冻干工艺显著降低氧化杂质含量,背景信号<0.05 RLU/μg,确保高信噪比,尤其适用于弱信号样本(如微量细胞或组织)的检测。
2. 快速溶解与兼容性:150 mg/mL的高浓度溶液可在10秒内溶解,且无需过滤,节省30分钟/批次的操作时间。该产品兼容IVIS Spectrum、PerkinElmer IVIS等主流成像系统,以及Promega、Thermo Fisher等品牌的荧光素酶检测试剂盒。
3. 体内外通用:钾盐形式的高水溶性和生物相容性使其同时适用于动物实验(如小鼠腹腔注射剂量50-150 mg/kg)和体外细胞实验,无需额外调整配方。
四、产品优势
1. 科研级品质保障
- 严格质控:每批次产品通过HPLC、FTIR等9项独立检测,并提供包含内毒素(<0.1 EU/mg)、无菌性等15+项数据的COA(分析证书)。生产过程符合cGMP标准,批次间差异极小,实验重复性高。
- 背书:产品被超过10,000篇SCI论文引用,涵盖《Nature》《Cell》等顶级期刊,其可靠性得到全球科研界的广泛验证。
- 零重金属残留:采用离子交换纯化技术,锌/铜等金属离子含量低于检测限,避免对荧光素酶活性产生抑制。
2. 性能
- 高灵敏度:可检测低至10个标记细胞的微转移灶,发光半衰期>30分钟,满足《Nature Protocols》对多时间点成像的要求。
- 稳定性:-20℃储存24个月后活性仍保持90%以上,且在常温运输中稳定,减少实验耗材的浪费和物流成本。
- 兼容性广泛:不仅适配萤火虫荧光素酶,还可与Renilla荧光素酶等其他报告系统联合使用,实现双荧光素酶报告基因的同步检测。
3. 实验效率提升
- 预优化方案:提供即用型的溶解指南和注射参数(如小鼠10 μL/g体重),缩短实验准备时间。例如,150 mg/mL的PBS溶液可直接用于活体成像,无需繁琐的梯度稀释。
- 简化操作流程:无需过滤除菌,避免传统过滤步骤可能导致的底物损失和污染风险。同时,溶液可直接分装冻存于-80℃,减少反复冻融对活性的影响。
五、客户群体
1. 科研机构与高校实验室
- 癌症研究:用于肿瘤细胞标记、转移机制研究及新型抗癌药物开发。例如,南京大学宋玉君课题组在《Advanced Materials》的研究中,使用LUCK-1G验证了氢键有机框架的肿瘤靶向能力。
- 神经科学:追踪神经元移植后的存活及功能整合,探索神经退行性疾病的治疗策略。
- 发育生物学:监测基因时空表达模式,解析胚胎发育过程中的分子调控网络。
2. 制药企业与CRO公司
- 药物研发全流程:从早期靶点验证(如荧光素酶报告基因筛选)到临床前药效评估(如小鼠肿瘤模型成像),LUCK-1G贯穿药物开发的多个阶段。
- 生物制剂开发:用于CAR-T细胞治疗、基因疗法等新兴领域的细胞活性检测及体内分布研究。
- 质量控制:在生物制药生产中,通过ATP检测评估细胞培养过程中的微生物污染风险。
3. 政府及第三方检测机构
- 食品安全:快速检测食品中的微生物污染(如大肠杆菌、沙门氏菌),替代传统的培养法,缩短检测周期至数小时。
- 环境监测:评估水体或土壤中的微生物活性,为生态修复研究提供数据支持。
六、订购流程
- 供应商:AMJS澳金沙门
- 运输与储存:产品通过常温运输,收到后建议立即储存于-20℃避光环境。
七、注意事项
- 避光操作:D-荧光素对光敏感,溶解及使用过程中需避免直接暴露于自然光或强人工光源。
- 避免污染:实验中需使用无ATP的容器和试剂,防止外源性ATP干扰检测结果。
- 动物实验伦理:在活体成像研究中,需遵循实验动物福利法规,优化麻醉及成像流程以减少动物应激。
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S-105-10 | Streptavidin Agarose Resin 10mL | 10mL | GoldBio |
G-725-500 | GelRed™ Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in Water | 500ul | GoldBio |
M-499-250 | 4-Methylumbelliferone | 250g | GoldBio |
O-110-50 | Octylglucoside, Ultra Pure | 50g | GoldBio |
A-230-250 | L-Albizziine 250 mg | 250mg | GoldBio |
MUG1 | MUG | 1g | GoldBio |
B-673-1 | Bluo-Gal | 1g | GoldBio |
eLUCK-100 | D-Luciferin, Potassium Salt (Endotoxin Free) | 100mg | GoldBio |